一、微量移液器的基本使用事项
1) 选择适当的Pipetman:不同型号的微量移液器,各有其吸取体积范围,请依取用溶液体积取用适当的微量移液器。
P10 0.5 ~ 10
P20 2 ~ 20
P100 20 ~ 100
P200 50 ~ 200
P1000 200 ~ 1,000
P5000 1,000 ~ 5,000
2) 设定体积:设定体积时,由低旋转至高值,须先超越所欲设定值至少三分之一转后,再反转至设定值;由高旋转至低值,则直接转至设定值即可。请勿将体积调整圈转到超过最低或最高的使用范围。
3) 套上微量移液器头,吸取溶液: 吸取溶液时,尖端请先套上微量移液器头 (tip),P1000 使用蓝色微量移液器头,P200 及P20 使用黄色微量移液器头。将按钮压至第一段,尽可能保持微量移液器垂直,将微量移液器头尖端浸入溶液,再缓慢释放生物技术核心实验第一章基本操作技术按钮 (图1.2)。释放按钮不可太快,以免溶液冲入吸管柱内而腐蚀活塞。微量移液器头尖端浸入溶液的程度随吸取的体积及使用型号而定:
P10 < 1 mm
P20, P100 2 ~ 3 mm
P200, P1000 2 ~ 4 mm
P5000 3 ~ 6 mm
4) 释放溶液: 将微量移液器头 与容器壁接触,慢慢压下按钮至第一段,停一两秒再压至第二段,把溶液完全压出。
使用注意事项
1) 勿将微量移液器本体浸入溶液中。
2) 吸取黏度高之试液,请先将微量移液器头尖端以刀片或剪刀将出口切大,并先行预润后再吸取。
3) 吸取酸液或具腐蚀性溶液后,请将微量移液器拆解开,各部位零件以蒸馏水冲洗干净,擦干后再正确组合回复原状。
4) 微量移液器的任何部份切勿用火烧烤,亦不可吸取温度高于70℃的溶液,避免蒸气侵入腐蚀活塞。
5) 套有微量移液器头的微量移液器,无论微量移液器头中是否有溶液,均不可平放,需直立架好。
6) P5000 必须使用过滤头,过滤头潮湿即需更换。
7) 若不小心使溶液进入吸管柱内时,应予以拆解,将活塞组件、吸管柱、O-ring、铁氟龙垫等各部位以清水冲洗干净后,再以酒精擦拭,擦干后再正确组合回复原状。
6 Methods in Biotechnology Vol 1
8) 定期自行以天平检查准确度,若有任何问题请送厂维修。
微量移液器Pipetman P 的使用
A, 保持微量移液器垂直,将按钮压至第一段;B, 微量移液器头尖端浸入溶液,缓慢释放按钮;C, 保持微量移液器垂直,将微量移液器头与容器壁接触,慢慢压下按钮至第一段;D, 压至第二段把溶液完全释放出;E, 释放按钮回原状。
二、微量移液器的精度校准
仪器用具:
Pipetman P1000, P200, P20
微量离心机
药品试剂:
Solution 1
Solution 2
方法步骤:
1) 请取六支微量离心管,分别标上A~F.
2) 以正确使用方法,依下表所列体积吸取不同溶液至各管中。
单位 A B C D E F
Solution 1 300 820 50 180 18 8
Solution 2 700 180 150 20 2 12
总体积 1000 1000 200 200 20 20
3) 将管盖盖好,置入微量离心机,离心数秒使溶液混合并集中于管底。
◆ 离心管 请注意要先平衡好!
4) 将适当微量移液器之体积调整圈调至总体积处,以干净的微量移液器头吸取管中的溶液,并检查:
(i) 微量移液器头尖端是否刚好充满溶液或留有一些空间?
(ii) 离心管中是否有溶液残留?
◆ 若微量移液器功能正常并且操作正确,离心管中应无液体残留,且微量移液器头尖端刚好充满溶液。 |