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快速检测食品微生物方法


运行平台:/WinXP软件评级:
文件大小:软件语言:简体中文
软件授权:免费软件演示地址:暂无演示
下载次数:5615 次发布时间:2009-08-30 9:48:18

软件简介:

    食品安全问题越来越受到人们的重视,微生物对食品的污染问题历来是人们关注的问题之一。在食品生产、加工、储存、运输、销售等各个环节中都有污染微生物的可能。一旦污染,微生物将大量繁殖而引起食品腐败变质,或导致食源性感染和食物中毒,对人们的危害极大,快速检验方法是社会的迫切需要。本文对中外食品中微生物的快速检测方法进行综述,以利于对食品进行快速的检测,达到预防食物中毒和肠道传染病的发生。
一、选择、鉴定用培养基法
  在培养基中加入特异性的生化反应底物、抗体、荧光反应底物、酶反应底物等,可使目标培养物的选择、分离、鉴定一次性完成。如生物一梅里埃公司的BP+RPF(兔血浆+纤维蛋白原)培养基,可在24h内鉴定金黄色葡萄球菌。Merk公司的chro mocult Coliform Agar培养基上,大肠杆菌为墨绿色至紫色菌落,沙门菌为淡绿色至蓝绿色菌落。柠檬酸杆菌和克雷伯杆菌为橙红色至红色菌落,其他肠道菌为无色菌落。
二、即用型3M细菌纸片法
  美国3M公司的perrifilmTMPlate系列微生物测试片,可分别检测菌落总数、大肠菌群计数、霉菌和酵母计数。还有检测乳杆菌、沙门菌、葡萄球菌的产品,这两个系列的产品与传统检测方法之间的相关性非常好。如用大肠菌群快检纸片检测餐具的表面,操作简便、快速、省料,特异性和敏感性与发酵法符合率高,已经被列为国标方法。使用时应正确掌握操作技术和判断标准,从而达到理想的检测效果。美国3M公司生产的PF(Petrifilm)试纸还加入了染色剂、显色剂,增强了菌落的目视效果,而且避免了热琼脂法不适宜受损细菌恢复的缺陷。
三、免疫学技术
  免疫学技术通过抗原和抗体的特异性结合反应,再辅以免疫放大技术来鉴别细菌。免疫方法的优点是样品在进行选择性增菌后,不需分离,即可采用免疫技术进行筛选。由于免疫法有较高灵敏度,样品经增菌后可在较短的时间内达到检出度,抗原和抗体的结合反应可在很短时间内完成。胶体免疫层析法能快速、灵敏检测金黄色葡萄球菌,应用胶体金免疫层析法检测食品中的沙门菌,简便快速,无需特殊仪器设备,适合现场检测之用。ATP生物发光法是利用ATP生物发光分析技术和体细胞清除技术,测量细菌ATP和体细胞ATP,用于食品生产加工设备洁净度检测的快速检测方法。微型自动荧光酶标分析法(mini VIDAS)是利用酶联荧光免疫分析技术,通过抗原、抗体特异反应,分离出目标菌,由特殊仪器根据荧光的强弱自动判断样品的阳性或阴性。VIDAS法检测冻肉中沙门菌具有很高的灵敏度和特异性,用于进出口冻肉的检测,可大大缩短检验时间,加快通关速度,检测冻肉中李斯特氏菌亦如此。
四、细菌直接计数法
  主要包括流式细胞仪(FCM)和固相细胞计数(SPC)法。FCM通常以激光作为发光源,经过聚焦整形后的光束垂直照射在样品流上,被荧光染色的细胞在激光束的照射下产生散射光和激发荧光。光散射信号基本上反映了细胞体积的大小;荧光信号的强度则代表了所测细胞膜表面抗原的强度或其核内物质的浓度,由此可通过仪器检测散射光信号和荧光信号来估计微生物的大小、形状和数量。流式细胞计数具有高度的敏感性,可同时对目的菌进行定性和定量。目前已经建立了细菌总数、致病性沙门菌、大肠埃希氏菌等的FCM检验方法。固相细胞计数可以在单个细胞水平对细菌进行快速检测。滤过样品后,存留的微生物在滤膜上进行荧光标记,采用激光扫描设备自动计数。每个荧光点可直观地由通过计算机驱动的流动台连接到ChemScan上的落射荧光显微镜来检测,尤其对于生长缓慢的微生物,检测用时短使该方法明显优于传统平板计数法。
五、全自动微生物分析系统(AMS)
  AMS是一种由传统生化反应及微生物检测技术与现代计算机技术相结合,运用概率最大近似值模型法进行自动微生物检测的技术,可鉴定由环境、原料及产品中分离的微生物。AMS仅需4h-18h即可报告结果,以常规法鉴定细菌,只能得到是或不是某种菌,要想知到是哪种菌还要做大量、烦琐的生化试验,而AMS则可以直接报告是什么菌。用AMS明显缩短肠道菌生化鉴定的时间,如鉴定沙门菌属只需4h,鉴定志贺氏菌属只需6h,鉴定霍乱弧菌等致病性弧菌亦只需4h-13h。总之,随着现代科技的发展,可以预料在不远的将来,传统的微生物检测技术将逐渐被各种新型简便的微生物快速诊断技术所取代。近年来兴起的基因探针技术及全自动微生物检测系统,将从根本上改变微生物的检测方法,具有非常广阔的应用前景。
  以上五种快速检测食品中的微生物方法,为最准确、省时、省力和省成本的快速检验方法。了解掌握以上五种方法利于对食品进行筛选和检测,最终对食品是否被微生物污染做出快速的反应,从而达到预防肠道传染病和食物中毒的发生的目的。

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